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    技術(shù)文章
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    Western Blot整體解決方案

    更新時間:2011-08-09  |  點(diǎn)擊率:4459

     

    Western Blot整體解決方案
    索萊寶生物公司秉承優(yōu)良的傳統(tǒng),在WB方面有獨(dú)到的建樹。
     
    Western Blot整體解決方案
     
    WB*步:組織或細(xì)胞蛋白提取
    蛋白提取的質(zhì)量直接決定著WB結(jié)果的好壞,因此,根據(jù)標(biāo)本類型和檢測類型選擇合適的蛋白制備方法是至關(guān)重要的!明睿生物綜合多家生產(chǎn)商之優(yōu)勢,提供各種蛋白標(biāo)本制備試劑盒:
    全細(xì)胞蛋白分離:該試劑盒提供細(xì)胞裂解液、蛋白酶抑制劑和DTT,可在非變性條件下從哺乳動物細(xì)胞和組織中提取全細(xì)胞蛋白。操作簡單、快速,整個過程不超過20分鐘,且不使用有毒物質(zhì)。所得蛋白能保持原來的活性,可以用于多種下游分析,如:酶活性分析、WB等。
    供貨商
    產(chǎn)品編號
    產(chǎn)品名稱
    規(guī)格
    報價
    Biovision
    K269-500
    Mammalian Cell Extraction Kit
    500 assays
    2812
    Millipore
    2910
    WHOLE CELL EXTRACTION KIT
    100 assays
    1368
    CST
    9803
    Cell Lysis Buffer (10X)
    15 ml
    623
    CST
    9806
    RIPA Buffer (10X)
    15 ml
    623
     
    線粒體/細(xì)胞漿蛋白分離:該試劑盒提供*的試劑可以從多種哺乳動物細(xì)胞(包括凋亡和非凋亡細(xì)胞)中分離出線粒體部分和胞漿部分,得到的蛋白保持了原有的生物學(xué)活性,可直接用于分析線粒體組分在胞漿和線粒體中分布的變化,如:WB、Elisa等。操作過程簡單、方便,不使用有毒的物質(zhì),無需超速離心。該試劑盒也可用于分離完整的線粒體架構(gòu)。
    供貨商
    產(chǎn)品編號
    產(chǎn)品名稱
    規(guī)格
    報價
    Biovision
    K256-100
    Mitochondria/Cytosol Fractionation Kit
    100 assays
    4028
    Biovision
    K256-25
    Mitochondria/Cytosol Fractionation Kit
    25 assays
    1900
    CST
    9852
    Chaps Cell Extract Buffer (10X)
    5 ml
    623
     
    細(xì)胞核/細(xì)胞漿蛋白分離試劑盒:該試劑盒提供完整的系統(tǒng),可從哺乳動物細(xì)胞和組織中分離細(xì)胞漿和細(xì)胞核蛋白,與其他同類試劑盒不同的是,該系統(tǒng)在分離過程中保持胞漿和胞核的完整,從而小程度的避免交叉污染。所得到的胞漿/胞核蛋白保持原有的活性,可用于下游分析,如:轉(zhuǎn)錄因子活性分析、CHIP分析、WB分析、EMSA分析、酶活性分析等。
    供貨商
    產(chǎn)品編號
    產(chǎn)品名稱
    規(guī)格
    報價
    Biovision
    K266-100
    Nuclear/Cytosol Fractionation Kit
    100 assays
    4028
    Biovision
    K266-25
    Nuclear/Cytosol Fractionation Kit
    25 assays
    1900
     
    細(xì)胞顆粒/細(xì)胞漿蛋白分離試劑盒:該試劑盒使用物理學(xué)的方法和*的試劑,快速的將細(xì)胞漿蛋白和細(xì)胞顆粒分開,從而避免了傳統(tǒng)分離方法所致兩組份間,尤其是小分子物質(zhì)的相互擴(kuò)散和交叉污染現(xiàn)象。從而可以準(zhǔn)確地進(jìn)行目的分子的亞細(xì)胞定位研究。
    供貨商
    產(chǎn)品編號
    產(chǎn)品名稱
    規(guī)格
    報價
    Biovision
    K267-50
    Cytosol/Particulate Separation Kit
    50 assays
    3724
     
    細(xì)胞膜蛋白分離試劑盒:該試劑盒提供*的組份和優(yōu)化的緩沖液,可以的從哺乳動物細(xì)胞和組織中分離分離細(xì)胞膜蛋白。與其他同類產(chǎn)品不同的是,該試劑盒不僅可以分離總的細(xì)胞膜蛋白(胞漿膜蛋白和細(xì)胞器膜蛋白),還可以特異性的分離高純度的胞漿膜蛋白,純度可以達(dá)到90%以上。得到的膜蛋白保持了原有的生物學(xué)活性,可以直接用于下游分析,如WB,2-D電泳,酶分析等。操作簡單,快速,整個過程只需要不到一個消失。
    供貨商
    產(chǎn)品編號
    產(chǎn)品名稱
    規(guī)格
    報價
    Biovision
    K268-50
    Membrane Protein Extraction Kit
    50 assays
    4028
     
    亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)蛋白分離:該試劑盒可以同時從一個細(xì)胞或者組織標(biāo)本中,分離細(xì)胞漿、細(xì)胞核、細(xì)胞膜和細(xì)胞骨架蛋白四種亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)蛋白。操作過程簡單,快速,不超過兩個小時。而且無需超速離心,不使用有毒物質(zhì)。所得到的蛋白保持了原有的生物學(xué)活性,可直接用于多種下游分析,如:B,1-D或者2-D電泳,凝膠遷移實(shí)驗和酶活性分析等。
    供貨商
    產(chǎn)品編號
    產(chǎn)品名稱
    規(guī)格
    報價
    Biovision
    K270-50
    FractionPREP Cell Fractionation Kit
    50 assays
    5700
    Millipore
    2145
    COMPARTMENT PROTEIN EXTRRACTION KIT
    1Kit
    4788
    石蠟包埋組織蛋白提取:該試劑盒使用的LiquidTissue@is 技術(shù)和試劑,專為直接從福爾馬林固定,石蠟包埋組織(FFPE)中提取蛋白而設(shè)計,使得對于該類標(biāo)本的檢測不再局限于IHC的方法。提取的蛋白可直接用于膜檢測分析或芯片檢測,尤其適用于蛋白質(zhì)組學(xué)分析。
    供貨商
    產(chǎn)品編號
    產(chǎn)品名稱
    規(guī)格
    報價
    KPL
    554-00-02
    PROTEOSOL TIS EX SYS,10AP
    10 reactions
    8316
     
    WB第二步:電泳,轉(zhuǎn)膜
    蛋白質(zhì)Marker是檢測電泳效果和確定待測靶蛋白分子量大小和正確與否的保證!
    預(yù)染蛋白Marker:實(shí)時監(jiān)測電泳和監(jiān)測過程,可直接觀察到目的蛋白的大小。但是不能曝光到膠片上。
    供貨商
    產(chǎn)品編號
    產(chǎn)品名稱
    規(guī)格
    范圍
    報價
    MBI
    SM0671
    PageRuler™ Prestained Protein Ladder
    2x250µl
    10-170kDa
    870
    MBI
    SM0441
    Prestained Protein Molecular Weight Marker
    2x250µl
    20-120kDa
    400
    MBI
    SM1811
    PageRuler™ Plus Prestained Protein Ladder
    2x250µl
    11-250kDa
    1100
    非預(yù)染蛋白Marker:需要染色后才能觀察到條帶的大小。
    供貨商
    產(chǎn)品編號
    產(chǎn)品名稱
    規(guī)格
    范圍
    報價
    MBI
    SM0431
    Unstained Protein Molecular Weight Marker
    2x1000µl
    14.4-116kDa
    400
    MBI
    SM0661
    PageRuler™ Unstained Protein Ladder
    2x250µl
    10-200kDa
    500
     
    生物素標(biāo)記的蛋白Marker:
    提供由十種生物素化重組蛋白混合組成的蛋白Marker及HRP標(biāo)記的抗生物素抗體,可用于辣根過氧化物酶顯色系統(tǒng)的WB檢測。尤其適用于化學(xué)發(fā)光檢測,可直接在膠片上顯示Marker條帶,更直接看到目的蛋白的大小。
    供貨商
    產(chǎn)品編號
    產(chǎn)品名稱
    規(guī)格
    范圍
    報價
    CST
    7727L
    Biotinylated Protein Ladder Detection Pack
    325 mini-blots
    10-200kDa
    2492
    CST
    7727S
    Biotinylated Protein Ladder Detection Pack
    65 mini-blots
    10-200kDa
    623
    其他電泳、轉(zhuǎn)膜相關(guān)產(chǎn)品
    供貨商
    產(chǎn)品編號
    產(chǎn)品名稱
    規(guī)格
    報價
    KPL
    60-00-50
    BIODYNE B MEMBRANE,(20CMX1M),1 ROLL
    1 roll (20 cm x 1 m)
    2472
    MBI
    R0891
    Protein Loading Buffer Pack
    1pack
    370
    MBI
    R1011
    DualColor™ Protein Loading Buffer Pack
    1pack
    400
    CST
    7722
    Blue Loading Buffer Pack
    1 Pack
    187
    CST
    7723
    Red Loading Buffer Pack
    1 Pack
    187
     
    WB第三步:加入一抗solarbio抗體*!
    Abcam:大的互聯(lián)網(wǎng)抗體王國,提供的不僅僅是抗體,還有抗體相關(guān)的一切!
    Chemicon:干細(xì)胞和神經(jīng)生物學(xué)抗體的!
    CST:信號轉(zhuǎn)導(dǎo)/磷酸化抗體的聚集地!
    Calbiochem:WB*抗體的集大成者!
    NeoMarkers:上萬種抗體,大中小包裝,滿足您各種需要!
    R&D:細(xì)胞因子抗體的佳選擇!
    Upstate信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的強(qiáng)者,磷酸酪氨酸抗體的金標(biāo)準(zhǔn)!
    Zymed:病理學(xué)抗體的!
     
    內(nèi)參的使用------WB過程檢測以及目的蛋白定量的標(biāo)準(zhǔn)!
    WB常用內(nèi)參及其技術(shù)參數(shù)
    內(nèi)參名稱
    分子量大小
    適用范圍
    Beta-actin
    43kDa
    胞漿和全細(xì)胞
    GAPDH
    30-40kDa
    胞漿和全細(xì)胞
    Tubulin
    55kDa
    胞漿和全細(xì)胞
    VCDA/Porin
    31kDa
    線粒體
    COXIV
    16kDa
    線粒體
    TBP
    38kDa
    細(xì)胞核
     
    進(jìn)口分裝內(nèi)參,現(xiàn)貨供應(yīng)!
    產(chǎn)品編號
    產(chǎn)品名稱
    規(guī)格
    報價
    M610
    Mouse monoclonal [AC-15] to beta Actin
    10 ul
    350
    M611
    rabbit polyclonal to beta-actin
    20 ul
    350
    M620
    Rabbit polyclonal to GAPDH
    10 ul
    350
    M621
    Mouse monoclonal [mAbcam 9484] to GAPDH
    20 ul
    350
    更多產(chǎn)品和技術(shù)資料, 
    WB第四步:加入二抗:
    solarbio提供各種種屬、各種亞型、各種標(biāo)記的二抗!
    KPL:進(jìn)口的抗體,國產(chǎn)的價格,*的品質(zhì),是您的選擇!
    SBA:穩(wěn)定的質(zhì)量,格式的包裝和價格,沒有不選擇的理由!
    更有進(jìn)口分裝產(chǎn)品
    二抗產(chǎn)品列表:
    供貨商
    產(chǎn)品編號
    產(chǎn)品名稱
    規(guī)格
    報價
    KPL
    04-18-06
    HRP,GT ANTI-MS,IGG(H+L),0.1MG
    0.1 mg
    393
    KPL
    074-1806
    HRP,GT ANTI-MS,IGG(H+L),1.0MG
    1.0 mg
    752
    KPL
    04-15-06
    HRP,GT ANTI-RB,IGG(H+L),0.1MG
    0.1 mg
    393
    KPL
    074-1506
    HRP,GT ANTI-RB,IGG(H+L),1.0MG
    1.0 mg
    781
    KPL
    14-13-06
    HRP,RB ANTI-GT,IGG(H+L),0.5MG
    0.5 mg
    584
     
    SB100
    HRP, Goat anti-Mouse, IgG(H+L)
    0.1 mg
    200
     
    SB200
    HRP, Goat anti-Rabbit, IgG(H+L)
    0.1 mg
    200
     
    SB300
    HRP, Rabbit anti-Goat, IgG(H+L)
    0.1 mg
    200
    更多產(chǎn)品信息請咨詢上海索萊寶生物公司
     
    WB第五步:結(jié)果檢測
    化學(xué)發(fā)光法or顯色法,*!
    化學(xué)發(fā)光法(ECL)
    辣根過氧化物酶(HRP)系統(tǒng):
    供貨商
    產(chǎn)品編號
    產(chǎn)品名稱
    規(guī)格
    使用膜面積
    報價
    KPL
    54-12-50
    KIT,PROT DETEC,WB,HRP,MS+RB,LUMI
    2500 cm2
    2500 cm2
    4391
    KPL
    54-61-00
    KIT,LUMIGLO«,A&B,2X120ML
    240 mL
    2400 cm2
    1766
    KPL
    54-61-01
    KIT,LUMIGLO«,A&B,6X120ML
    720 mL
    7200 cm2
    3761
    KPL
    54-61-02
    KIT,LUMIGLO«,A&B,2X30ML
    60 mL
    600 cm2
    691
    KPL
    54-13-50
    KIT,PRDECT,LUMI RESERVE  WB,2400CM2
    2400 cm2
    2400 cm2
    7831
    KPL
    54-71-00
    KIT,LUMIGLO RESERVE CHEMI,2400CM2
    2400 cm2
    2400 cm2
    6359
    KPL
    54-71-01
    KIT,LUMIGLO RESERVE CHEMI,600CM2
    600 cm2
    600 cm2
    2384
    Amersham
    RPN2109
    ECL™ Western Blotting Detection Reagents
    1000 cm2
    1000 cm2
    1955
    Amersham
    RPN2134
    ECL™ Western Blotting Detection Reagents
    6000 cm2
    6000 cm2
    5716
    堿性磷酸酶(AP)系統(tǒng)
    具有以下優(yōu)點(diǎn):
    靈敏度高:可檢測到fg級檢測的蛋白
    發(fā)光時間長:發(fā)光時間長達(dá)5天,允許反復(fù)曝光(WB)和讀數(shù)(Elisa)
    操作簡單:單組份試劑即用型,只需加到雜交膜或96孔板中檢測即可
    保存時間長:4度可穩(wěn)定保存2年
    靈活:適用于膠片曝光或者儀器成像分析
    經(jīng)濟(jì):用量少,并可節(jié)省其它試劑
    相關(guān)產(chǎn)品信息
    供貨商
    產(chǎn)品編號
    產(chǎn)品名稱
    規(guī)格
    使用膜面積
    報價
    KPL
    55-60-01
    PHOSPHAGLO RESERVE AP SUB,30ML
    30 mL
    600 cm2
    1670
    KPL
    55-60-02
    PHOSPHAGLO RESERVE AP SUB,100ML
    100 mL
    2000 cm2
    4754
    KPL
    55-60-03
    PHOSPHAGLO AP SUBSTRATE, 30ML
    30 mL
    600 cm2
    1193
    KPL
    55-60-04
    PHOSPHAGLO AP SUBSTRATE,100ML
    100 mL
    2000 cm2
    3198
     
    顯色法:操作簡單、無需暗室等曝光設(shè)備。KPL提供專門針對WB優(yōu)化的底物,保證高的靈敏度和低的背景。
    供貨商
    產(chǎn)品編號
    產(chǎn)品名稱
    規(guī)格
    報價
    KPL
    50-77-00
    KIT,TMB MB SUBSTRATE,440ML
    440 mL
    1342
    KPL
    50-77-01
    SOLN,TMB MB,ENHANCER,40ML
    40 mL
    464
    KPL
    50-77-03
    KIT,TMB 1-C MB,2X100ML
    200 mL
    1037
    KPL
    50-77-04
    SOLN,TMB 1-C,MB,1000ML
    1 L
    3753
    KPL
    50-77-18
    TMB MB SUBSTRATE 1-C,100ML
    100 mL
    638
    KPL
    54-11-50
    KIT,PROT DETEC,WB,HRP,MS+RB,TMB
    2500 cm2
    4072
    KPL
    55-11-50
    KIT,PROT DETEC,WB,AP,MS+RB,BCIP/NBT
    2500 cm2
    4072
     
    Western Blot其他相關(guān)產(chǎn)品
    蛋白酶抑制劑:抑制標(biāo)本制備過程中蛋白酶的活性,大程度保證待測蛋白的完整性
    供貨商
    產(chǎn)品編號
    產(chǎn)品名稱
    規(guī)格
    報價
    應(yīng)用范圍
    Biovision
    K271-500
    Protease Inhibitor Cocktail
    1 kit
    1748
    廣譜蛋白酶抑制劑
    Merck
    539131-1VL
    Protease Inhibitor Cocktail Set I
    1VL
    552
    廣譜蛋白酶抑制劑
    Merck
    539134-1ML
    Protease Inhibitor Cocktail Set III
    1ML
    1122
    適用于哺乳動物細(xì)胞和基于金屬螯合層析純化的組織抽提物,適用于2-D電泳
    Merck
    616370-10MG
    Aprotinin  Bovine Lung  Crystalline
    10MG
    938
    絲氨酸蛋白酶抑制劑,可逆的競爭性抑制蛋白水解及酯水解活性,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
    Merck
    516481-5MG
    Pepstatin A  Synthetic
    5MG
    754
    天冬氨酸蛋白酶的可逆性抑制劑
    封閉溶液:去除非特異性的結(jié)合,大程度保證結(jié)果的特異性
    供貨商
    產(chǎn)品編號
    產(chǎn)品名稱
    規(guī)格
    報價
    KPL
    71-83-00
    KIT,DETECTOR BLOCK,2X120ML&2X10GM
    240 mL
    1775
    KPL
    50-61-00
    KIT,BSA DILUENT BLOCK,2X100ML
    200 mL
    1535
    KPL
    50-61-10
    SOLN,BSA DILUENT BLOCK,1000ML
    1 L
    6602
    KPL
    50-82-01
    KIT,MILK DILUENT BLOCK,2X100ML
    200 mL
    1317
     
    洗滌溶液:去除多余的未結(jié)合物質(zhì),進(jìn)一步保證結(jié)果的特異性和靈敏度
    供貨商
    產(chǎn)品編號
    產(chǎn)品名稱
    規(guī)格
    報價
    KPL
    50-63-00
    KIT,WASH SOLUTION CONC.,4X200ML
    800 mL
    966
     
    其他產(chǎn)品
    供貨商
    產(chǎn)品編號
    產(chǎn)品名稱
    規(guī)格
    報價
    KPL
    60-00-51
    HYBRIDIZATION BAGS,(8INX10IN),50/PK
    50 bags
    809
    KPL
    55-15-00
    SOLN,AP STABILIZER,200ML
    200 mL
    1386
    KPL
    54-15-01
    SOLN,HRP STABILIZER,200ML
    200 mL
    1199
     
    洗脫和再雜交試劑:擁有ReBlot系統(tǒng),同一張膜上反復(fù)多次檢測不再是難題!
    供貨商
    產(chǎn)品編號
    產(chǎn)品名稱
    規(guī)格
    報價
    Millipore
    2060
    ReBlot Western Blot Recycling Kit
    1 Kit
    2890
    Millipore
    2500
    ReBlot Plus Kit
    1 Kit
    1950
    Millipore
    2502
    ReBlot Plus Mild Antibody Stripping Solution, 10x
    50ml
    1150
    Millipore
    2504
    ReBlot Plus Strong Antibody Stripping Solution, 10x
    50ml
    1150
    Millipore
    2520
    Blot Restore Membrane Rejuvination Kit, 10x
    1 Kit
    1950

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