Sigma原裝 H0137

HT（原裝） H0137

產品簡介：

貨號：H0137

產品品牌：sigma

產品名稱：HT（原裝） H0137

產品明細：

詳細說明：

本試劑盒適合于從血清、細胞上清、淋巴液中提取DNA病毒基因組，不適合于RNA病毒基因組的提取。使用本試劑盒提取的基因組DNA可用于各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR、文庫構建、Southern雜交等實驗。
操作步驟：
使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶上的標簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。
1、取病毒上清液0.5ml，12000rpm離心5min，盡量吸盡上清使用，棄去沉淀。
2、向病毒上清中加入20ul的蛋白酶K（10mg/ml），充分混勻，65℃消化10-20min，期間可顛倒離心管混勻數(shù)次。
3、向管中加入500ul結合液，充分混勻。再向管中加入400ul無水乙醇，充分混勻，此時可能會出現(xiàn)絮狀沉淀，不影響DNA的提取，可將溶液和絮狀沉淀都加入吸附柱中，靜置2min。（吸附柱的大容積為750ul，可分兩次加入。一次吸附完離心后再將余下的混合液體加入柱中靜置離心。）
4、12000rpm離心2min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。
5、向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。
6、向吸附柱中加入600ul漂洗液，12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。
7、12000rpm離心2min，將吸附柱置于室溫或50℃溫箱放置數(shù)分鐘，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除， 否則漂洗液中的乙醇會影響后續(xù)的實驗如酶切、PCR等。
8、將吸附柱放入一個干凈的離心管中，向吸附膜中央懸空滴加50ul-100ul經(jīng)65℃水浴預熱的洗脫液，室溫放置5min，12000rpm離心1min。
9、離心所得洗脫液再加入吸附柱中，室溫放置2min，12000rpm離心2min，即可得到高質量的病毒基因組DNA。

公司簡介

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